برای ثبت سفارش و سنتز پرایمر به سایت sinaclon.com مراجعه فرمایید.

آنزیم smarTaq DNA Polymerase

classical pattern mini scarf
امتیاز 5 از 5

توضیحات محصول

– پلی‌مراز مقاوم به حرارت با فرآیندسازی بالا

– مناسب برای PCR تا دمای 95°C

– فاقد فعالیت اگزونوکلئاز 3’→5’

– سازگار با نوکلئوتیدهای تغییر یافته

– مناسب برای تعیین توالی و کلونینگ

– عملکرد بهینه در pH≈9 و دمای 75°C

تومان
محدوده قیمت: ۷,۸۰۰,۰۰۰ تومان تا ۳۵,۰۰۰,۰۰۰ تومان

توضیحات

SinaClon Taq DNA Polymerase

SinaClon Taq DNA Polymerase

(نوترکیب)

محصولات

Taq DNA Polymerase

  • DP1601 : 100 واحد
  • DP1602 : 500 واحد
  • DP1603 : 2500 واحد
  • DP1604 : 5000 واحد

مشخصات عمومی

  • غلظت: 5 واحد در میکرولیتر
  • نگهداری: °20- سانتی‌گراد
  • حمل‌ونقل: یخ خشک یا یخ تر

توضیحات

آنزیم Taq DNA Polymerase در ابتدا از باکتری گرمادوست Thermus aquaticus BM جدا شد؛ سویه‌ای که فاقد اندونوکلئاز محدودکننده Taq است. سپس در E.coli کلون‌سازی و به‌گونه‌ای خالص‌سازی شد که هیچ‌گونه اندو یا اگزونوکلئاز غیر اختصاصی نداشته باشد. این آنزیم دارای زنجیره‌ای تک‌پپتیدی با وزن تقریبی 95 کیلو دالتون است، عملکرد 5'→3' دارد و فاقد فعالیت اگزونوکلئاز 3'→5' می‌باشد. بیشترین فعالیت در pH≈9 (در 20°C) و دمای حدود 75°C دیده می‌شود. پایداری فوق‌العاده در 95°C باعث می‌شود برای PCR بسیار مناسب باشد. این آنزیم نوکلئوتیدهای تغییریافته را به‌خوبی می‌پذیرد و برای نشان‌دارسازی DNA با بیوتین، DIG و رادیونوکلئوتید استفاده می‌شود. فرآیندسازی بالا و نبود فعالیت اگزونوکلئازی، آن را برای تعیین توالی DNA به‌خصوص در رفع ساختارهای ثانویه، ایده‌آل می‌سازد.

اجزا

• محلول 50 میلی‌مولار کلرید منیزیم و بافر PCR ده‌برابری AMS (حاوی سولفات آمونیوم) همراه با SmarTaq DNA Polymerase.
• محلول 50 میلی‌مولار کلرید منیزیم و بافر PCR ده‌برابری همراه با Taq DNA Polymerase.
• بافرهای PCR با غلظت 10X عرضه می‌شوند.
• بافر PCR ده‌برابری شامل 500 میلی‌مولار KCl و Tris-HCl با pH=8.4 است.
• بافر AMS شامل 200 میلی‌مولار سولفات آمونیوم و Tris-HCl با pH=8.8 است.
• محلول 50 میلی‌مولار کلرید منیزیم در تیوب جداگانه ارائه می‌شود.

تعریف واحد

یک واحد از آنزیم مقدار 10 نانومول ماده DNA قابل‌رسوب با اسید را طی 30 دقیقه در 74°C درج می‌کند.

کاربردها

• تکثیر PCR (برای SmarTaq تضمین تکثیر قطعات تا 5000 جفت‌باز)
• نشان‌دار کردن DNA
• تعیین توالی DNA
• PCR برای کلونینگ

بافر نگهدارنده

20 میلی‌مولار Tris-HCl با pH=7.9، 0.1 میلی‌مولار EDTA، 5 میلی‌مولار 2ME، مواد پایدارکننده افزوده شده، و 50% گلیسرول.
کنترل کیفیت و پروتکل PCR

کنترل کیفیت و پروتکل PCR

(SinaClon Quality Control & PCR Protocol)

کنترل کیفیت

عدم وجود اندونوکلئاز

1 میکرولیتر DNA لامبدا همراه با 10 واحد Taq در 50 میکرولیتر بافر تست حاوی 1.5 میلی‌مولار MgCl2 به مدت 16 ساعت در 65 درجه سانتی‌گراد انکوبه می‌شود. هیچ تخریب قابل مشاهده‌ای در DNA وجود ندارد. 1 میکرولیتر قطعه Eco/Hind لامبدا همراه با 10 واحد آنزیم تحت همان شرایط تست می‌شود و هیچ تغییری در الگوی باند مشاهده نمی‌شود.

عدم وجود فعالیت Nicking

1 میکرولیتر DNA سوپرکویل pBR322 با Taq در 50 میکرولیتر بافر حاوی MgCl2 به مدت 4 ساعت در 65°C انکوبه می‌شود. آنزیم هیچ‌گونه Relaxation در DNA ایجاد نمی‌کند.

عدم وجود فعالیت Priming

100 نانوگرم DNA قالب بدون پریمر همراه با 10 واحد آنزیم در 100 میکرولیتر بافر حاوی MgCl2 و dNTP تحت شرایط PCR انکوبه می‌شود. طبق آنالیز ژل آگاروز، هیچ سنتز DNA رخ نمی‌دهد.

پایداری حرارتی

10 واحد آنزیم 30 دقیقه در 95°C انکوبه شده و سپس در واکنش PCR استفاده می‌شود. طبق بررسی با ژل آگاروز، سنتز DNA انجام می‌شود.

آزمون عملکردی

SinaClon Taq DNA Polymerase برای تکثیر همزمان قطعات 977 و 788 جفت‌بازی از DNA ژنومی انسانی، ویروس‌های DNA و همچنین تکثیر cDNA (ویروس‌های RNA) تست شده است.

پروتکل پایه PCR

این پروتکل یک دستورالعمل عمومی و نقطه شروع برای انجام PCR است. شرایط دقیق (دمای انکوباسیون، غلظت آنزیم، پریمر، MgCl2 و DNA) بسته به نوع آزمایش باید به‌صورت تجربی تعیین شود. اجزا را در میکروتیوب استریل 0.5 میلی‌لیتری روی یخ اضافه کنید.

PCR در 25 تا 35 چرخه انجام می‌شود:

Denaturation: 93°C به مدت 45 ثانیه
Annealing: 55°C به مدت 30 ثانیه
Extension: 72°C به مدت 90 ثانیه

شرایط بهینه واکنش ممکن است تغییر کند و باید توسط کاربر تعیین شود. پیش از باز کردن، بافرها و آنزیم را مخلوط کرده و سانتریفیوژ کنید.

دانلود کاتالوگ Taq DNA Polymerase

دانلود کاتالوگ

Taq DNA Polymerase – Official Catalogue

دریافت فایل PDF

برای دانلود کاتالوگ محصول Taq DNA Polymerase سیناکلون، روی دکمه زیر کلیک کنید:

دانلود کاتالوگ PDF

توضیحات تکمیلی

غلظت

2500u -5 u/µl, 500u -5 u/µl

1 دیدگاه برای آنزیم smarTaq DNA Polymerase

  1. طراح سایت

    خیلی خوب

دیدگاه خود را بنویسید

نشانی ایمیل شما منتشر نخواهد شد. بخش‌های موردنیاز علامت‌گذاری شده‌اند *